Initiation of lipid peroxidation by iron as [ferric chloride] in hepatic fish microsomes in vivo and vitro

The antioxidant effect of dl-alpha-tochopherol acetate [vitamin E], ascorbic acid [Vitamin C] and reduced glutathione [GSH] were studied in-vivo and in vitro peroxidizing system of fish hepatic microsomes. Lipid peroxidation [LP] measured as malondialdehyde [MDA] compound, was not significant altered and inhibited until the concentrations of these antioxidant reached a critical level which depend on the effectiveness of the oxidative stress. Combination between these antioxidants [dl-alpha-tochopherol and GSH] or [dl-alpha-tochopherol and ascorbic acid] are elicit a marked and ascorbic acid] are elicit a marked and progressive reduction to lipid peroxidation. The rational of the cooperation was discussed on the basis of the hydroperoxyl radical scavenging capacity of vitamin E and the reduction of membrane hydroperoxide by glutathione and ascorbic acid. The inhibition of LP by dl-alpha-tochopherol acetate and glutathione was found concomitantly with a decrease in the concentration of its reduced form and a corresponding increase in oxidized tochopherol and glutathione disulfide levels. The study also investigated the relationship between LP and some enzyme inactivation in fish hepatic microsomes. In microsomes incubated with iron as [ferric chloride], glucose-6-phosphatase [G6P-ase] and cytochrome P-450 [Cyt. P-450] levels were decreased rapidly and concurrently with increased level of thiobarbituric acid-reactive substances. Microsomal nicotinamide adenine dinucleotide phosphate cytochrome-c reductase [Cyt-cRas] little affected during incubation period. Addition of antioxidant partially protected against inactivation of G6P'ase and Cyt P-450, as well as LP induced by ferric chloride

Fluidificacion de la membrana microsomal hepatica y su relacion con el envejecimiento / Fluidity of hepatic microsomal membrane and its relation with aging

El efecto del envejecimiento sobre la composición fosfolipídica de la membrana hepática fue estudiada en dos grupos de ratas Wistar jóvenes (2 meses) y maduros (6 meses). Cuando fue analizado el contenido fosfolipídico microsomal total, el grupo de ratas maduras mostró un incremento significativo (73%). El patrón fosfolipídico microsomal también mostró un comportamiento diferente en ambos grupos, con un significativo incremento en fosfatidilcolina (62%), fosfatidilserina (124%), fosfatidilinositol (31%) y esfingomielina (10%) y aparente en fosfatidiletanolemina y fosfatidilglicerol en el grupo de 6 meses. Una elevada fluidificación de la membrana microsomal en animales añosos fue relevado por un incremento en el índice PC/EM (47%). Este incremento en la fluidificación durante el proceso de envejecimiento puede reflejar una respuesta adaptativa resultante en cambio en la actividad enzimática responsable del metabolismo de drogas y carcinógenos

Composicion fosfolipidica de la membrana microsomal hepatica u su relacion con la actividad de la bilirrubina UDP-Glucuroniltransferasa en colestasis humana / Phospholipid composition of the hepatic microsomal membrane and its relationship to bilirubin UDP glucuronyltransferase in human cholestasis

Han sido descriptos diversos cambios estructurales y morfológicos sobre el hepatocito cuando se utilizaron modelos de coelstasis experimental asimismo se han documentado alteraciones en la actividad de las denominadas "enzimas unidas a membrana" frente a los cambios en el entorno lipídico. En el presente estudio se estableció la actividade de la bilirrubina UDP-Glucuraniltransferasa y el perfil fosfolipídico microsomal en hepatocitos de individuos control y en pacientes con colestasis extrahepática prolongada. No se hallaron diferencias significativas en la actividad total de Bilirrubina UDP-Glucuroniltransferasa entre ambos grupos de pacientes (normales: 1,11 ñ 0,66; colestáticos: 1,93 ñ 0,82 nmoles bilirrubina conjugada/mg proteína en 10 min). Sin embargo cuando el producto final de la reacción se analizó, los controles presentaron 80% de bilirrubina diglucuronido (20% bilirrubina monoglucuronido), resultando ausente este metabolito en los pacientes colestáticos (100% bilirrubina monoglucuronido). El análisis cualitativo de los fosfolípidos reveló una disminución en el contenido de fosfatidilcolina (-9,5%) y fosfatidiletanolamina (-62,9%) y, paralelamente, incrementos en fosfatidilserina (+143,4%) y esfingomielina (+475,6%) en los microsomas dle grupo colestático cuando se comparó con el grupo control. Por el contrario el contenido de fósforo total resultó similar en ambos grupos estudiados (normales: 979, 55 ñ 42,15; colestáticos: 958, 26 ñ 30,86 umol Pi/mg proteina). Los datos presentados en este estudio demuestran que la capacidad de bilirrubina y el perfil fosfolipídico microsomal se ven seriamente afectados durante la colestasis humana. En próximas experiencias se intentará esclarecer la relación entre ambos hechos como así también delucidar el mecanismo de los cambios inducidos por la acumulación de bilis